J Clin Invest：揭示USP9X去泛素解构ALDH1A3并维持GCSs的间充质特性

外膜母细胞会瘤（GBM）是最类似于和破坏病态的大脑恶病态，其特征在于广泛的内异质病态。尽管除此以外在多模式病人总体获得了进展，但GBM病征的结果即便如此令人沮丧。GBM拥有一个细胞会亚群，称作GBM胚胎会（GSCs），具备自我更新活病态和多向分立潜能以及起始并能。因此，迫切需要追寻针对GSC的新病人策略。并且，醛脱氢酶（ALDH）超家族包含19种酶，它们将内源和外源醛糖类成相应的羧酸。ALDH1A3是主要的ALDH同工酶，参与人体细胞会的各种生理过程。更多的证据得出结论，ALDH1A3在癌症胚胎会（CSCs）中都乏善可陈单单很高活病态，并影响这些细胞会内的各种生物学特征。在GBM中都，已注意到ALDH1A3作为维持间充质（MES）GSC的自我更新和致瘤病态的这两项化学键。然而，MES GSCs中都ALDH1A3嗜睡的选择病态即便如此是神秘的。2019年4月初8日，南京医科大学第一药学院王慧博团队等人在The Journal of Clinical Investigation上单单版二本书“USP9X deubiquitinates ALDH1A3and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells”的文章，注意到USP9X是一种或许的DUB，可可调ALDH1A3多磷酸化化和稳定化。并且，USP9X是分析ALDH1A3hi MES GSCs可溶病态的这两项化学键，是MES GSCs自我更新和致瘤病态所必需的。同时还评量了USP9X抑制作用对病征来源的MES GSC异种超级任天堂框架的潜在治果。为了确定ALDH1A3抗原是否被磷酸化 - 磷酸化系统（UPS）翻译成后支配，研究者工作人员首先可用放线菌酮（CHX）阻断抗原质从头合成并HEK293T细胞会和以致于星形外膜细胞会（NHAs）中都的ALDH1A3抗原质水准。其实，ALDH1A3在CHX检视的8小时内迅速脱水并几乎监测不到。此外，用磷酸化类固醇MG-132检视细胞会导致ALDH1A3抗原水准显着增很高。这些数据得出结论ALDH1A3通过UPS脱水。接下来，研究者工作人员寻求鉴别都由ALDH1A3稳定化的潜在DUB，并可用靶向HEK293T细胞会中都的98DUB的siGENOMERTF文库同步进行RNAi筛选。该研究者初始筛选鉴别了与ALDH1A3暗示具体的4个DUB（USP3，USP9X，USP22和OTUD1）。当这些DUB与HEK293细胞会中都的ALDH1A3共暗示时，注意到只有USP9X尽可能与内源病态ALDH1A3必要相互作用，从而说明了USP9X是支配ALDH1A3稳定病态的显着候选物。为了次测试这一点，将Flag标记的WT USP9X或催化失活的表型C1566A USP9X（在催化结构域的一个这两项半胱氨酸中都携带点突变）转染到HEK293T细胞会中都。 WT USP9X而非C1566A表型的暗示以剂量依赖病态方式增很高ALDH1A3抗原水准，得出结论USP9X以依赖其DUB活病态的方式可调ALDH1A3。外膜母细胞会瘤（GBM）胚胎会（GSC）的间充质（MES）亚型代表者癌细胞会亚群，其因其很高度侵袭病态和对常规疗法的抗病态而而出名。除此以外已提单单醛脱氢酶1A3（ALDH1A3）作为维持GSC的MES特征的这两项决定因素。然而，支持出现异常ALDH1A3暗示的选择病态即便如此难以捉摸。在该研究者中都，研究者工作人员注意到磷酸化特异病态抗原酶9X（USP9X）是MES GSC中都ALDH1A3的或许去磷酸化化酶。 USP9X与ALDH1A3相互作用，解聚并稳定化。此外，研究者结果推断FACS分选的USP9Xhi细胞会可溶病态具备很高ALDH1A3活病态和有效致瘤并能的MES GSC。USP9X的耗尽显着下调ALDH1A3，导致MES GSC的自我更新和致瘤并能的夺去，这可以通过ALDH1A3的异位暗示给予很大程度的起死回生。此外，研究者工作人员还证明USP9X类固醇WP1130抑制ALDH1A3脱水并且在MES GSC衍生的原位异种超级任天堂框架中都推断单单显着的病人功效。另外，USP9X与原发病态人GBM样品中都的ALDH1A3暗示排斥具体，并且对于具备MES亚组的病征具备预后价值。总的来说，研究者结果说明了了USP9X作为ALDH1A3抗原稳定化的这两项去磷酸化化酶和GSC定向病人的潜在靶点。原始单单处：Zhengxin Chen，et al.USP9X deubiquitinates ALDH1A3 and maintains mesenchymal identity in glioblastoma stem cells.J Clin Invest.April 8， 2019