CRISPR-Cas种系统是原核海洋生物用来抵御外来表型元件吞并的获得性特异性种系统。其中,III同型 CRISPR-cas种系统较强多种特异性活性,其畸变多肽需要:(1) 切削crRNA匹配的化学合成RNA;(2) 在相结合化学合成RNA时,切削转录泡周遭的ssDNA;(3) 在相结合化学合成RNA时,合成第二信使——末端寡聚腺苷酸(cOA);cOA需要相结合三角洲畸变物Csm6/Csx1,并诱导后者颇高效切削非酪氨酸ssRNA 。
此时不仅吞并大分子元件的转录本但会受到副产物,细胞内转录本也但会被切削,从而引起细胞内休眠。III同型种系统所诱导的核糖遗传物质活性需要受到完全符合的控制,否则但会可避免非预期的细胞内毒性甚至细胞内死亡。
2018年,英国White课题组断定一种包含CARF亚基、被称为末端遗传物质的细胞内需要以不依赖性金属和离子的方式也切削cOA,并可能进行基因表达III同型种系统的特异性活性。
然而,末端遗传物质的活性所能副产物颇高浓度的cOA,而III同型种系统的畸变多肽恰恰较强颇高效的cOA合成潜能。这矛盾之三处似乎假定未确定因素进行III同型种系统特异性活性的基因表达。
2020年9月初15日,华中农业大学中文元课题组在 Cell Reports 新闻周刊发表了月出版:A membrane-associated DHH-DHHA1 nuclease degrades type III CRISPR second messenger 的研究课题成果。
该研究课题断定了副产物cOA的新同型遗传物质。该酵素可能进行基因表达III同型种系统的特异性活性,可避免长时间的特异性声势浩大对细胞内造成受到影响。
本文写作者首先从冰岛硫化叶菌的细胞内杀菌剂中鉴定造出了金属和离子依赖性的、细胞内膜联系的cOA副产物活性,并断定在颇高cOA浓度下,金属和依赖性的cOA副产物活性显着提颇高了清除cOA的效率。
随后,写作者分离得到了金属和离子依赖性的DHH-DHHA1家族遗传物质(MAD),并对其进行了一系列体内、体外研究课题。结果显示MAD较强三个优点:(1)较强极颇高的cOA副产物潜能;(2)相结合在细胞内膜上;(3)较强非酪氨酸的DNA和RNA副产物活性。
膜联系DHH-DHHA1遗传物质(MAD)进行基因表达III同型种系统特异性活性的指导工作模同型
根据这些优点,写作者提造出了MAD的指导工作模同型。大肠杆菌吞并引发III同型CRISPR-cas种系统的特异性声势浩大,即通过合成cOA激发Csx1的遗传物质活性。
在cOA水准较低时,cOA主要由末端遗传物质副产物,而MAD的膜联系的优点但会限制其对时才cOA的副产物,从而可避免过早重开特异性声势浩大;当cOA的浓度多达末端遗传物质的副产物潜能时,扩散到细胞内膜周遭的cOA但会被MAD更快副产物,从而可避免特异性声势浩大长时间太长时间对细胞内造成受到影响。
这些断定指出“心地善良”的微海洋生物需要复杂、精准地基因表达特异性声势浩大,从而考虑到并不相同大肠杆菌吞并的情况下,在与大肠杆菌的内战中存活。
华中农业大学时才命科学技术所学院工商管理研究课题生赵瑞亮和杨洋为联合第一写作者,中文元教授为该研究课题的通讯系统写作者。
目前,中文元课题组起动成熟期,拥有充足的费用,在“微海洋生物特异性种系统的指导工作必要”和“基于CRISPR技术的基因组工程”两个研究课题领域招募研究生。欢迎有特异性学、海洋生物化学和海洋生物信息学背景的青年科学研究来信交流。
值得注意造说是:
Ruiliang Zhao,Yang Yang,Fan Zheng,et al.A Membrane-Associated DHH-DHHA1 Nuclease Degrades Type III CRISPR Second Messenger.Cell ReportsARTICLE| VOLUME 32, ISSUE 11, 108133, SEPTEMBER 15, 2020DOI:
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